Jackson ImmunoResearch纳米二抗（Nano Secondary Antibodies）

驼科，如羊驼和美洲驼，会产生一类独特的仅由重链组成的抗体。而抗原结合片段(Fab)，也称为仅可变重链片段抗体(Variable Heavy-Chain only fragment antibodies，VHH片段)，或纳米抗体，是一种新型抗体形式。凭借其15 kDa的小尺寸和出色的特异性和穿透性，VHH为高质量和高分辨率成像提供了一个极好的解决方案。Jackson ImmunoResearch 开发的纳米二抗（Nano Secondaries）是一种专门的检测试剂，利用VHH片段的独特特性来获得更好的检测结果。

图1.常规IgG与VHH的比较，驼科动物如羊驼只产生重链IgG。IgG2和3的抗原结合结构域(Fab片段)不包含重链的CH1结构域，并且轻链也不存在。

Jackson ImmunoResearch纳米二抗是羊驼产生的多克隆VHH片段抗体(纳米抗体)。它们对人、兔或小鼠具有特异性。小于15kDa的VHH片段抗体比传统的全IgG抗体小10倍，非常适合需要良好穿透性的成像实验。纳米二抗经过交叉吸附处理，对目标物种具有高度特异性，与其他常用物种的交叉反应性极低，使其适用于多种标记实验。它们可与报告酶和一系列荧光染料结合，包括Alexa Fluor，为高分辨率免疫组织化学和免疫荧光提供了选择。

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纳米二抗的优势：

1、小尺寸可以获得更高分辨率的图像

纳米抗体的大小是常规抗体的几分之一，很容易被用作共聚焦和高分辨率成像的工具，纳米抗体直径小，是用于间接标记的常规抗体复合物大小的五分之一(24-30nm)，减少了探针和抗原之间的距离，允许捕捉更高分辨率的图像。

图2.用纳米二抗染细胞突出亚细胞成像的滋养层染色。（Cytokeratin 8 (blue) (DyLight? 405 VHH Fragment Anti-Rabbit (611-474-215)), vinculin (green) (Alexa Fluor? 488 VHH Fragment Anti-Mouse(615-544-214)), and phalloidin (F-actin) (red). Cytokeratin is an intermediate filament and vinculin is a type of focal adhesion. Both images were blocked with 10% Alpaca serum (028-000-001).）

2、多克隆保证可靠和优越的信号

多克隆对于表达量不高的靶标也能通过放大信号保证高灵敏度。多克隆抗体提供了一种异质的抗体群体，每种抗体都有不同的抗原决定簇来检测一抗的不同部分。多克隆纳米二抗可以通过结合整个一抗，而不是有限的特定位点/区域/序列，从而保证多克隆纳米二抗可以大量结合，实现更高的标记效率和更亮的信号。

图3.示意图显示了与单克隆纳米抗体相比，多克隆纳米二抗能够结合更多的一抗的缀合物。

3、卓越的穿透力和清除能力

纳米抗体由于其较小的尺寸而表现出优异的组织穿透性，并且由于其扩散系数低于常规抗体，这使其能够在组织中自由移动。缺乏可结晶片段(Fc)进一步提高了该分子从组织中的清除能力，使其成为免疫PET等诊断成像技术的优秀工具。

图4.利用纳米二抗进行formalin固定石蜡包埋(FFPE)小鼠脑中酪氨酸羟化酶的免疫组化染色结果。

4、适用于死细胞或活细胞样本染色

具有Fc片段的常规免疫球蛋白通常仅适用于固定样品的染色，因为活细胞的受体会通过Fc片段结合影响生物功能。所以缺少Fc片段的纳米抗体可用于活细胞的免疫染色。

5、交叉吸附保证获得更好的特异性和更低的背景

Jackson ImmunoResearch纳米二抗VHH抗体会与常间物种进行交叉吸附处理，以降低背景并增强特异性。

6、适用于多种荧光染料

Jackson ImmunoResearch纳米二抗可与从紫外到远红外的广谱范围的荧光染料结合，使研究人员在进行实验时，尤其是识别多种靶蛋白时，具有最大的灵活性。

图5. 利用纳米二抗进行多重标记染色。（Lung tissue stained for E-cadherin (epithelial cells) (green) (AF488 VHH Alpaca Anti-Rabbit (611-544-215)) and Alpha-smooth muscle actin (magenta) (AF647 VHH Alpaca Anti-Mouse 615-604-214).）

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609-064-213	Biotin-SP (long spacer) VHH Fragment Alpaca Anti-Human IgG (H+L)??(min X Bov, Ms, Rb Sr Prot)
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